Препарирование гениталий чешуекрылых

Сообщество и Форум → Энтомологические коллекции → Препарирование гениталий чешуекрылых

lepidopterolog, 09.11.2007 23:24

Надеюсь, тема будет полезна для всех. Предлагаемая методика - далеко не единственная, поэтому каждый может написать, какой методикой пользуется он. Посвящается Рипперу
Итак, приступим Тонкими маникюрными ножницами до половины отрезается брюшко препарируемого экземпляра и кладётся в пробирку. В пробирку наливаем немного 10-20 % щёлочи (лучше всего КОН) и ставим её в кастрюлю на водяную баню. Вода не должна попадать в пробирку! Вода в кастрюле доводится до кипения, кастрюля держится на слабом огне 30-40 мин (в зависимости от размеров бабочки - чем крупнее вид, тем дольше). Снимаем с огня и осторожно вынимаем пробирку. Тонким пинцетом достаём брюшко и кладём его в чашку Петри с водой. Далее предстоит очень кропотливая работа: нужно осторожно достать генитальный аппарат из брюшка, удалив всё лишнее (мышцы, связки, остатки жирового тела и т.д.). Делать это лучше всего под бинокуляром или мощной лупой. Как правило, после варки гениталии легко извлекаются надавливанием на конец брюшка тупой препаровальной иглой. С помощью двух игл половые органы очищаются от всего лишнего, достаются из воды и обсушиваются на фильтровальной бумаге. Теперь гениталии можно поместить на постоянное хранение в каплю глицерина в ячейку блистера от таблеток, которая накалывается на булавку с бабочкой. Вот, собственно, и всё
Гениталии расправляются непосредственно при просмотре, на предметном стекле в капле глицерина. Надо добавить, что щёлочь можно повторно использовать довольно много раз, пока она не побуреет. При одновременной варке нескольких брюшек главное не перепутать, каким гениталиям какая бабочка соответствует. Для этого используются пронумерованные пробирки, а на каждую булавку с бабочкой накалывается бумажка с её номером.
Метод только кажется громоздким, однако он совершенно несложен (у меня всё получилось с первого раза).

Сообщение было отредактировано lepidopterolog - 09.11.2007 23:38

Едкий кали покупается на рынке, продается в пластиковых белых банках с герметично завинчивающейся крышкой.

Мне рассказывали такую методику.
Препарат помещается в пробирку со щелочью. Далее на горло пробирки накидывается кусок марли, сложенный в несколько раз. При кипячении щелочь иногда может "стрелять", и марля нужна для того, что бы из пробирки не вылетали брызги.
Далее, берется кусок газеты, сворачивается в трубку, трубка сплющивается и таким образом из газеты получается плотная бумажная полоска шириной около 2 см. Полоску складываем вдвое, таким образом, что этой полоской огибается/ охватывается пробирка, края марли при этом должны попасть под полоску, т.е. быть нею прижаты, что бы марля не свалилась с горловины пробирки. Далее держим всю конструкцию за сложенные вместе концы полоски и кипятим над спиртовкой или на газу.
Кипятим пока в пробирке не останется чистый хитин. После чего промываем и рассматриваем под бинокуляром или микроскопом.
Законсервировать препарат можно в капле сахарного сиропа. В последствии препарат кладется в воду и сахар растворяется.

Поблагодарили: 2

13.11.2007 17:27, lepidopterolog

to RippeR: без щёлочи никак: она склеротизирует мягкие ткани (часто при диагностике используются не только жёсткие хитиновые структуры, но и мускулатура) и просветляет
хитин. Варить надо на водяной бане, а не на спиртовке - тогда щёлочь не будет доходить до кипения и, соответственно, выстреливать из пробирки. Хранить лучше всего в капле глицерина. Идеальное хранилище для препаратов - кусочки, нарезанные из пластиковой ленты для проявки фотоплёнки "Коррекс" (к сожалению, сейчас её не выпускают).

Поблагодарили: 1

Поблагодарили: 2

03.12.2007 21:24, NicoSander

Вываривание брюшка производится в 10 – 15%-м растворе едкого калия(натрия). При варке в химической пробирке на спиртовке во избежание выбрасывания кипящего раствора, необходимо постоянное потря-хивание, что способствует также быстрому удалению чешуек и позволяет своевременно заметить готовность препарата (прозрачность брюшка). Мелкие препараты обычно требуют обработки в течение 1 – 2 мин., крупные – до 5 и более мин. Лучше, однако, не варить брюшко до полной прозрачности – остатки тканей и жировое тело можно разрушить препаровальными иглами под бинокуляром, сохраняя целость брюшка, после чего для просветления препарата бывает достаточно двух-, трехкратного вскипания. Иногда, особенно при одновременной обработке нескольких препаратов, вываривание производят в тиглях или бюксах на электрической плитке или применяют длительное выдерживание в холодном растворе щелочи. Промывку препаратов во избежание появления пузырьков воздуха предпочтительнее проводить в кипяченой воде. Рассматривают препараты в чистом глицерине; для крупных бабочек берут солонку или стекло с лункой, мелкие препараты помещают в каплю глицерина на обычное предметное стекло. Гениталии вытягивают из брюшка препаровальными иглами и расправляют в нужном ракурсе. В некоторых случаях для сохранения необходимого положения препарат приходится прижимать куском покровного стекла.

Поблагодарили: 1

Поблагодарили: 2

Поблагодарили: 1

04.12.2007 23:10, Nephilim

К сожалению, меня уже опередили - см. тему "где купить этилацетат", сообщение от NicoSander. Вообще рецепт есть в любом учебнике орг. химии за 11 по-моему класс(называется этиловый эфир уксусной кислоты). Единстенная сложность - серная к-та, но в принципе ее можно (аккуратно!!!) слить из старого аккумулятора(только в стекл. посуду).
А вообще я не понимаю всех этих заморочек с эт-том, у меня в баночке с ватой, смоченной уксусной кислотой все мгновенно дохнут; да и для здоровья не так вредно и достать легко- в любом прод. магазине

упс, извиняюсь, не видел update

Сообщение было отредактировано Nephilim - 04.12.2007 23:13

Поблагодарили: 1

05.12.2007 5:41, Вадим Якубович

Добрый вечер! Щелочь - не этилацетат, ее легко "сделать" самому.
Берете обычную пищевую соду (NaHCO3), насыпаете не слишком толстым слоем в железное блюдечко и греете. Щелочь - мелкий белый порошок:

NaHCO3 → NaOH + CO2↑

(!) Выделяется угл. газ. Не так чтобы вредно, но форточку лучше открыть.
Ps: этилацетат тоже получить не сложно, но по-моему укс. кислота гораздо удобнее.
Рад, если кому помог

Не получится. Максимум, образуется Na2CO3 и выделяется углекислота с водой. Есть старинный метод, когда раствор карбонат натрия/калия кипятили с гашеной известью. Через какое-то время в надосадочной жидкости накапливалось достаточно высокая концентрация щелочи. Кстати, сам карбонат натрия обладает щелочными свойствами. А проще, зайдите в школу, в кабинет химии и попобирайтесь. Вещество - то копеечное, не откажут.

Новый комментарий

Зарегистрируйтесь на сайте и/или зайдите в свой аккаунт, чтобы загружать новые сообщения и комментарии.

* По умолчанию переводом комментариев c русского на английский занимается администрация сайта. Если вы хотите по максимуму сохранить авторский стиль либо просто облегчить жизнь переводчику — скопируйте текст вместе с тегами из окна с русским комментарием, вставьте его в окно английского и замените русский текст на английский, сохранив теги.